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            人胰島素原 (PI)ELISA kit使用說明書

            更新時間:2023-12-21   點擊次數:90次

            人胰島素原  (PI)ELISA使用說明書

            胰島素原(PI)是胰島素的前體激素 , 它是由由胰島β細胞合成和分泌 , 主要 在腎臟分解代謝。生理情況下 ,只有極少量的胰島素原釋放入血 ,在病理情 況下 ,胰島β細胞釋放胰島素原增多 ,血中胰島素原水平升高。 它是細胞在 裂解成成熟胰島素之前分泌的最后一個單鏈蛋白結構。 它是由芝加哥大學的Donald F. Steiner教授在1967年發現的。


            本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA 。往預先包被有人 胰島素原(PI)捕獲抗體的微孔中 ,依次加入樣本、標準品、生物素標記的檢測 抗體 ,HRP  酶結合物 , 中間經過溫育和洗滌 ,用底TMB  顯色 ,TMB 在過 氧化物酶(HRP)的催化下轉化成藍色 ,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色 的深淺和樣品中的人胰島素原(PI)呈正相關。用酶標儀在 450nm  波長下測定

            吸光度(OD   ,計算樣品濃度。

            靈敏度:4.79pg/mL

            檢測范圍12.5-800pg/mL

            特異性:可檢測樣本中人的PI ,且與其類似物無明顯交叉反應。

            image.png

            濃度(pg/mL)

            800

            400

            200

            100

            50

            25

            12.5

            0

            OD  

            2.32

            1.93

            1.31

            0.85

            0.51

            0.39

            0.28

            0.1

            校正 OD  

            2.22

            1.83

            1.21

            0.75

            0.41

            0.29

            0.18

            -


            試劑盒性能:

            1.    重復性 :板內變異系數小于  10% ,板間變異系數小于  10%。

            2.    回收率 :在選取的健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入  3  個不同

            濃度水平的人PI ,計算回收率。

             

            樣本類型

            范圍(%

            平均回收率(%

            血清(n=8)

            84- 101

            96

            血漿(n=8)

            92- 105

            102

            細胞培養上清(n=8)

            96- 108

            105

            3.    線性稀釋:分別在選取的4份健康人血清、血漿和細胞培養上清中加入

            高濃度人PI ,在標準曲線動力學范圍內進行稀釋 ,評估線性。

             

            稀釋比例

            回收率(%

            血清

            血漿

            細胞培養上清

            12

            范圍

             

            84-95

             

            88-97

             

            90- 110

            平均回收率

             

            91

             

            93

             

            96

            14

            范圍

            89- 103

            87- 108

            105- 115

            平均回收率

            94

            98

            109



            上海仁捷生物科技有限公司

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